檢測儀器設(shè)備
1.高效液相色譜儀:具熒光檢測器。
2.色譜柱:填料粒徑為5pm，柱長15cm，內(nèi)徑4.6mm的C18反相色譜柱，或其他等效色譜柱。
3.樣品瓶:500ml具磨口塞的棕色細口玻璃瓶或帶聚四氟乙烯襯墊的棕色螺紋口玻璃瓶。
4.微量注射器:10ul、50ul和100ul。
5.氮吹儀。
6.超聲波清洗儀:輸出功率在180W以上，工作頻率為40kHz。
7.固相萃取裝置。
檢測水樣采集
采樣前向樣品瓶中加入硫代硫酸鈉，每500ml樣品加入40mg。采樣時，應(yīng)使樣品充滿采樣瓶，不留液上空間。如果樣品的pH不在6-9之間，用鹽酸溶液或氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至6-9。采集的樣品應(yīng)在4℃以下冷藏、避光保存，5d內(nèi)萃取。萃取后的洗脫液在4℃以下冷藏、避光保存，4d內(nèi)分析完畢。
水樣的制備
1.固相萃取柱的活化
將固相萃取柱固定在固相萃取裝置上，先用5ml甲醇以約2ml/min的流速通過固相萃取柱，在填料暴露于空氣之前，向柱上加5ml水，待水剩約2ml時，停止活化。
2.富集、凈化與濃縮
量取150ml水樣置于250ml錐形瓶中，以約2ml/min的流速通過活化后的固相萃取柱，水樣完全富集后，加入5ml乙酸溶液，待乙酸溶液完全流出后，加入8ml甲醇淋洗，待甲醇完全流出后，繼續(xù)用真空泵抽吸5min。用7ml氨水甲醇溶液洗脫，洗脫液收集到濃縮瓶中。然后將濃縮瓶置于氮吹儀上，在60℃濃縮至1ml，再用水定容至2.0ml，混勻后經(jīng)濾膜過濾到棕色水樣瓶中，待測。
3.空白試樣的制備
用實驗用水代替水樣，按照與試樣的制備相同步驟進行空白試樣的制備。
具體檢測步驟
1.色譜參考條件
流動相A：乙腈，流動相B：乙酸銨溶液；洗脫程序為等度洗脫，流動相A/流動相B=20/80（V/V），流速：1.0ml/min；柱溫：40℃；激發(fā)波長：292nm，檢測波長：395nm；進樣體積：40.0ul。
2.建立校準曲線
分別取適量的聯(lián)苯胺標準使用液Ⅰ或聯(lián)苯胺標準使用液Ⅱ，用甲醇水溶液稀釋，制備至少5個濃度點的標準系列，聯(lián)苯胺的質(zhì)量濃度分別為2.00ug/L、5.00ug/L、10.0ug/L、50.0ug/L、100ug/L、200ug/L（此為參考濃度）。按照色譜參考條件，由低濃度到高濃度依次對標準系列溶液進樣，以聯(lián)苯胺的質(zhì)量濃度（ug/L）為橫坐標，對應(yīng)的色譜峰面積或峰高為縱坐標，建立校準曲線。
3.水樣的測定
被檢測水樣及空白試樣可以按照與校準曲線的建立相同的條件進行試樣的測定。
聯(lián)苯胺標準色譜圖
最后定性分析也可根據(jù)水樣中聯(lián)苯胺化合物與標準系列中目標化合物的保留時間進行定性，可采用不同波長下的熒光強度比輔助定性，必要時用高效液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜法進行確認。而定量分析可以按照相關(guān)的公式進行計算。
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